Анотація

Протеїни білкового шоку належать до природних біомаркерів, які є важливими показниками діагностики хвороб тварин та / або інструментом аналізу впливу на організм чинників, що погіршують середовище існування. Забруднення води важкими металами, особливо Плюмбумом (навіть у невеликих кількостях), є дуже небезпечним і негативно впливає на організм риби. Аналіз токсичного впливу іонів Плюмбуму на рівень експресії таких протеїнів теплового шоку, як HSP70 та HSC70 в печінці та зябрах лускатого коропа, був основною метою нашого дослідження. Такі дослідження є вкрай актуальні та важливі для оцінки здоров’я риб у рамках моніторингу водних біоценозів.

У дослідженнях використовували дворічних особин коропа лускатого масою 270–350 г. Досліди проводили в резервуарах об’ємом 200 л. До кожної експериментальної групи вводили по 7 особин. Необхідні рівні концентрацій важких металів у всіх серіях експерименту були змодельовані додаванням у басейн з рибою 0,2; 0,5 і 5 мг / дм³ Плюмбуму (у вигляді Pb (CH3COO)2×3Н2О). Ці концентрації відповідають 2-му, 5-му та 50-му індексам граничного порогового значення Плюмбуму у водному середовищі. Концентрацію HSP70 і HSC70 визначали дот-блот аналізом за рахунок застосування моноклональних антитіл проти протеїнів теплового шоку [5A5] (ab2787) (Abcam, США) і [1B5] (ab19136) (Abcam, США) та поліклональних козячих антимишачих антитіл, кон’югованих із лужною фосфатазою («Tropix», США).

Методом імуноблотингу було виявлено дозозалежне збільшення протеїнів HSP70 у печінці та зябрах (р <0,001) усіх дослідних груп риб. Водночас істотних змін експресії протеїнів HSC70 не встановлено. Це свідчить про те, що стрес-протеїни є чутливими маркерами токсичних ефектів надмірної концентрації Плюмбуму.